Escherichia coli penisilin asilazının CMC konjugasyonuyla pH stabilizasyonu
Özet
90 kDa mol ağırlığında karboksimetilselüloz (CMC) ile konjuge olan Escherichia coli Penisilin G asilaz’ının sıcaklık ve pH’ya karşı geri dönüşümsüz inaktivasyonu çalışılmıştır. Karboksimetilselüloz periyodat oksidasyonu ile aktive edilmiş ve PGA’a, Schiff bazı oluşumu ile kovalent olarak bağlanmıştır. PGA ve modifiye olmuş PGA farklı zaman ve farklı pH değerlerinde (pH 4-9) inkübe edilmiştir. PGA’ın pH karşısındaki en yüksek stabilitesi, pH 8’de 4 kat olarak elde edilmiştir. CMC’un çapraz bağlanması sonucu PGA enziminin optimal pH ve kcat değeri değişmemiştir. Km, ve Vm değerleri ise azalmıştır. Konjuge PGA için farklı pH değerlerinde inaktivasyonun aktivasyon serbest enerjisi (ΔGi) PGA’nınkine göre daha yüksek bulunmuştur.
Anahtar Kelimeler: Enzim stabilizasyonu, Escherichia coli, karboksimetilselüloz konjugasyonu, penisilin G asilaz.
Tam Metin: PDF